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  • 分子生物学器材
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    • PCR仪 核酸分子分选技术助力单病毒基因组学研究

      点击量:0   达普生物更新于2022-09-26

      向测序通过将资源集中在感兴趣的分子上,以实现高灵敏度及经济有效的目标区域深度平行测序。通常感兴趣的靶标或生物以百分之几的比例存在,处于治疗中的病毒DNA更是以人基因组的十亿分之几存在。为避免DNA测序的大量浪费,需要对靶标进行富集,然而现有的PCR或杂交捕获方法在靶向富集能力和目标捕获长度方面都很有限。据此,来自加州大学旧金山分校的科学家们开发了基于微流控单液滴分选技术对靶标核酸富集,实现了使用最小的先验目标信息,实现长度为>10kbp分子的百万倍富集。本研究通过对HIV感染者的HIV原病毒单个基因组的分离和测序证明这种方法的有效性。该方法适用于研究和临床应用中的罕见靶点测序,包括识别癌症相关突变或感染细胞的病毒测序,研究结果发表在《AnalyticalChemistry》杂志上。实验设计1、需要富集的DNA混合物、引物、探针及反应mix混合;2、用数字PCR液滴包裹仪将上述反应体系分割成单液滴;3、PCR扩增;4、微流控单液滴分选富集阳性液滴并回收DNA;5、DNA与引物、探针及反应mix混合并PCR扩增;6、二次液滴分选;7、回收DNA测序或qPCR检测。实验流程实验结果分析1、数字PCR扩增后进行单液滴阳性分选,成功从含107倍lambdaDNA背景中富集出了ΦX174病毒基因组,第一轮富集度为160倍,第二轮富集达16000倍,证实单液滴分选联与数字PCR用可实现对微量靶标基因组的高效富集。2、将感染HIV病毒的细胞与非HIV感染细胞gDNA混合以模拟潜伏感染HIV的浓度,之后通过数字PCR与单液滴分选联用富集回收含HIV的液滴,测序结果显示:●分离出了含完整病毒基因组的液滴,富集度高达600万倍;●不但实现了单个病毒的分离和测序,还获得整合的原病毒全长基因组;●确定HIV在宿主基因ARIH2中的整合位点;●有效的解决了抗逆转录病毒治疗期间低载量HIV的检测,为单病毒基因组学研究提供强大工具。总结数字PCR技术与单液滴分选技术联合用于富集微量核酸靶标测序:1、能以最小的已知序列富集长片段分子,如对≥100kb的分子进行百万倍富集,可用于宏基因组样本中人类基因突变或自然产物基因簇富集测序特征分析。2、该方法可检测到任何核酸,包括通过添加逆转录步骤的RNA,可以实现对融合基因或低丰度变异进行测序。3、能对如HIV等罕见单一病毒基因组高灵敏度回收和测序,为单个病毒基因组学的研究提供强大工具。解决方案达普生物秉承为广大科研及临床工作者和企业客户提供世界领先技术平台的理念,聚团队研发力量结晶开发了基于微流控技术的单液滴分选和数字PCR技术平台——Comet彗星单液滴分选仪+Nebula星云全自动数字PCR系统,全面解决超微量核酸靶标测序瓶颈,为单个病毒基因组学、靶序列富集相关的宏基因组测序,低丰度变异样本、融合基因等研究提供强大工具。参考文献:SequencingUltrarareTargetswithCompoundNucleicAcidCytometry,2021,Anal.Chem.

    • 基因枪/导入仪 微流控高通量单细胞测序在医学中的应用
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    • 基因枪/导入仪 单细胞转录组测序分析揭示EGFR突变肺腺瘤中抑制性免疫肿瘤微环境
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  • 通用实验仪器
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    • 离心机 如何解决台式高速离心机常见的故障问题

      点击量:0   综仪生物更新于2022-09-26

      台式高速离心机除了广泛应用于生产工艺外,还可以广泛应用于实验室。目前,该设备广泛应用于临床医学、生物化学、基因工程、免疫学等领域,是各级医院、科研院所和高校院校用于离心分离的必备仪器。随着国内离心技术的不断发展,国产台式高速离心机也在不断进步。目前市场上不乏一些操作稳定、体积小、外形美观、温升低、效率高、适用性广的中高端离心机设备。但在台式高速离心机的使用过程中,很多行业内人都说会出现电机不运转,或者速度达不到额定速度,低速档不能启动,噪音大等问题。我们需要提前掌握设备的常见故障及相应的解决方案,有利于用户及时处理故障。台式高速离心机的常见故障有哪些?如何处理?问题1:台式高速离心机通电后,电机不转。电机相当于整个设备的发动机,如果不转那后续的操作则无法运行。鉴于这种情况,通常需要先检查电源线、插头和插座。如果损坏,应更换。如果没有问题,检查波段开关或变阻器是否损坏或连接是否断开;如果损坏或断开,更换损坏的部件并重新焊接接线;如果没有问题,检查电机磁场线圈是否断开;如果连接断开,可以重新焊接。如果线圈内部存在断路只能重绕线圈。问题2:台式高速离心机电机有运转,但是转速达不到额定转速,这种情况是什么原因呢?又该怎么办?技术人员建议,用户可以先检查轴承,如轴承损坏则更换轴承;如轴承内部缺油或污物太多则应清洗轴承并加注润滑脂。另外,需要检查整流子表面是否有异常,或电刷与整流子轰面的配合是否吻合,当整流子表面有异常,如有一层氧化物,可以用细砂纸对其进行打磨。如果整流子与电刷的配合不吻合,则应调整到接触良好的状态。排除了以上问题,用户则需要检查转子线圈中是否有短路的现象,如有则应重绕线圈。问题3:天气寒冷时,台式高速离心机低速档不能启动。这种情况主要是受天气的影响,可以润滑油凝固或润滑油变质干涸粘住。开始时,可用手帮助重新转动或清洗后主动重新上油。问题4:台式高速离心机震动明显,噪音大。业内建议,先检查是否有不平衡的问题存在。另外,检查固定机器的螺是否松动,如有则固紧;检查轴承是否损坏或弯曲,如有则更换轴承。如果是因为机器外罩变形或位置不正确发生摩擦,则需要对其进行调整。

    • 离心机 冷冻离心机安装调试需要注意的事项
      2022-09-26
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  • 科研检测试剂
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    • 抗微粒体抗体 医用空气消毒机的一些知识点

      点击量:10   德远更新于2022-07-08

      医用空气消毒机的一些知识点医用空气消毒机主要是对室内污染空气进行净化消毒,将净化消毒后的洁净空气输送到房间,这样保证了室内空气质量,为我们营造健康舒适的生活环境。很多人不太了解医用空气消毒机的工作原理和产品特点,认为医用空气消毒机在生活和工作中是不可或缺的。事实上,医用空气消毒机与我们的工作和生活息息相关,在环境污染严重的今天,它的作用越来越重要。那么医用空气消毒机的主要用途和功能是怎么样的?请看下面的内容。医用空气消毒机的主要用途有:1.对医院的诊室、病房、手术室进行空气净化消毒,这样无菌健康的医院环境,可以使得患者病能够更快康复。2.对学校、教室、密闭环境人员密集场所的空气进行净化消毒,有效阻断封闭环境中病毒的传播,降低流感等病毒的感染风险,从而保护师生的身体健康。3.无菌车间、食品生产线等对空气有严格要求的封闭场景,医用空气消毒机能够很好的吸附空气中的颗粒和灰尘,净化很多病毒和细菌,从而提高了产品质量和工人的工作效率。4.对于人员复杂、流动性大的餐厅、酒店等公共场所,医用空气消毒机可以净化并消毒环境,降低疫情下的感染风险。医用空气消毒机的主要作用是:1.去除空气中的颗粒物空气消毒器可以有效去除空气中的灰尘、煤尘、烟雾等各种可吸入的悬浮颗粒,从而防止人体吸入这些有害的浮尘颗粒。2.快速去除化学气体空气消毒器能有效去除挥发性有机物、甲醛、苯、农药、雾化碳氢化合物、油漆、家具和装修等释放的有害气体。并避免吸入有害气体引起的过敏、咳嗽、咽炎、肺炎等身体不适症状。3.有效消除异味空气消毒器对于化学品、动物、烟草、油烟、装修、垃圾等散发的异味和空气污染也有不错的作用,24小时净化室内空气,使得室内空气能够进行良性循环。4.去除微生物和污染物空气消毒器能吸附空气中及物体表面的细菌、病毒、霉菌、霉菌,清除空气中死皮屑、花粉引起的病源,减少疾病在空气中的传播。空气是人类生命的基本需求,它永远伴随着我们。空气是我们赖于生存的东西。如果我们长期不注意空气质量,对于我们的健康和生活效率会有很大的影响。事实证明,精工医用空气消毒机不仅有用,在家居生活中也不可或缺。

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